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血漿游離血紅蛋白測定方法

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血漿游離血紅蛋白測定實(shí)驗(yàn)中,介紹實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以及注意事項(xiàng).
 
 
 
實(shí)驗(yàn)原理 
   
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色.根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測出其含量.
實(shí)驗(yàn)方法
  材料:
  12g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
  21%H2O2
  310%醋酸溶液
  4.分光光度計(jì)
  方法:
  1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿.
  2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度.

    3.
計(jì)算公式
  血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
  參考范圍:0-40mg/L
注意事項(xiàng)
  1.一切容器避免血紅蛋白污染;
  2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
  3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
  4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確.
 

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