血清是細胞培養(yǎng)中的重要元素之一，在實驗室操作中要注意及處理的方法：
 

　　1.血清的保存
 

　　血清應(yīng)保存在-5℃~-2O℃。若存放于4℃，請勿超過一個月。若無法一次用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
 

　　2.解凍血清的方法
 

　　將血清從冷凍箱取出后，先置于2~8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。(融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻)
 

　　3如何處理血清解凍后的絮狀沉淀物
 

　　血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，也是造成沉淀物的主要原因之一，但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
 

　　想要去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。(不建議以過濾的方法去除絮狀沉淀物，因為可能會阻塞過濾膜)
 

　　4.為什么要熱滅活血清
 

　　加熱可以滅活補體系統(tǒng)，激活的補體參與溶解細胞，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
 

　　5.做熱滅活有必要嗎
 

　　實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，大多數(shù)的細胞不需要。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或完-全沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響血清質(zhì)量，造成細胞生長速率的降低。經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成顯著增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。(若非必要無需做此步驟，不但節(jié)省時間，也確保血清的質(zhì)量)
 

　　6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀
 

　　胎牛血清沒有預(yù)老化，儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁，不會影響血清的質(zhì)量。(推薦在-20℃儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融)
 

　　7.避免沉淀物的產(chǎn)生
 

　　①解凍血清時，按照所建議的步驟逐步解凍(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
 

　?、诮鈨鲅鍟r，請隨時搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
 

　?、壅埼饘⒀逯糜?7℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
 

　?、苎宓臒釡缁罘浅Ｈ菀自斐沙恋砦锏脑龆?，若非必要，可以無須做此步驟。
 

　　⑤若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。⑥溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增加。
 

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